Часть представителей племени Левия, которые не были священниками, служили в храмовой страже. Эта стража была своего рода органом правопорядка, и ею руководил начальник храма. Иудейский философ Филон Александрийский описывает обязанности храмовой стражи так: «Некоторые из них [левитов] стоят у самого входа, служа привратниками. Некоторые стоят внутри [на территории храма], перед святилищем, чтобы туда — намеренно или нет — не зашли посторонние. Некоторые, сменяя друг друга, днем и ночью совершают обход храма».

Храмовая стража находилась в ведении Синедриона. Она была единственным иудейским вооруженным формированием, разрешенным римлянами.

По мнению библеиста Иоахима Иеремиаса, «если арестовать Иисуса пришла именно храмовая стража, тогда становится понятным его вопрос о том, почему его не арестовали в Храме, хотя он изо дня в день учил там (Матф. 26:55)». Иоахим Иеремиас считал, что те, кого ранее посылали арестовать Иисуса, тоже принадлежали к храмовой страже (Иоан. 7:32, 45, 46). Позднее храмовой страже вместе с начальником храма приказали привести в Синедрион учеников Иисуса. И они, судя по всему, были среди тех, кто схватил Павла в храме (Деян. 4:1—3; 5:17—27; 21:27—30).